寄生虫感染的检验
寄生虫是一种病原体,如单细胞生物(原虫)或蠕虫,它们通过寄生于其他生物体(宿主)内得以生存。寄生虫病是临床常见的疾病,不仅给广大人民群众的健康造成危害, 而且还会影响到畜牧业的发展。不过,随着生活水平的提高和社会生活方式的改变,人们的疾病谱也相应地发生了变化,寄生虫感染似乎逐渐淡出了人们的视线。
“但绝对不能忽视。”随着饲养宠物的种类和数量的增多,寄生虫感染的发病率呈上升趋势。今天,我们就来盘点一下寄生虫检验。
(一)寄生虫检验的现状
国内目前的寄生虫检验状况不容乐观,很多检验科只保留个别寄生虫检验项目,甚至不开展了。而在国外,大多数医院的临床微生物实验室依然安排有专职人员进行寄生虫检验。比如美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)有两名专职人员从事寄生虫检验工作,每天都要对80~90份寄生虫标本进行检验,并且阳性率近10%。
“难以想象,500多张床位的规模,寄生虫检验有这么大的标本量和这么高的阳性率。”曾在UCLA交流学习过的顾兵坦言,在国内有些实验室每个月进行寄生虫检验的数量不超过两位数。那么,UCLA寄生虫检验的专家是如何进行疟原虫涂片检验呢?
“每个标本均需要涂厚血片和薄血片,每张片子在显微镜下至少要看到300个视野,才会发报告。”顾兵曾估算过,即便是一个经验丰富的寄生虫专家,也要花费两个小时才可以发一张疟原虫涂片检验报告。
国内实验室不重视寄生虫检验的原因可能有两点:复杂的操作、没有可观的经济效益。在此我们也不再赘言。
(二)寄生虫检验的技术发展
传统检验人体寄生虫病原体多为通过粪便检验或血液检验等病原检查方法,但该方法因操作复杂等原因应用得越来越少。而绝大多数实验人员更乐于采用免疫学或分子生物学方法来实验诊断寄生虫感染情况。
“但病原检验作为寄生虫感染确诊的依据,最好在有条件获取病原学诊断结果的实验室,都不要轻易放弃病原检验这个环节。”仇锦波表示,病原检测是寄生虫感染实验诊断的一条基本原则。
但对于某些深部器官或组织的寄生虫感染,以及在其他特殊情况下,病原检测很难得到明确结果时,仇锦波认为,就应该想方设法检验寄生虫的循环抗体或循环抗原了。
特别是随着免疫学、分子生物学的快速移植和应用,寄生虫检验技术也相应得以提高。比如,基因芯片技术正逐步用于寄生虫检测的实验研究,这也让诸多业内人士看到了希望。
不过,仇锦波也提醒,在寄生虫检验方面也尚存在很多困难。比如寄生虫抗原的纯化、免疫诊断的标准化和自动化问题。
(三)寄生虫的实验室检验
病原检查
免疫学检查
分子诊断
检测的靶物质为寄生虫基因组中特异性的DNA片段。例如根据碱基互补原理可设计并标记DNA 探针(probe)进行原位杂交(in situ hybridization);也可设计合成引物进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增样本中微量的DNA片段。将免疫检测技术与基因扩增技术嫁接而创立的PCR-ELISA ,用于疟原虫的检测,最低可测阈值为0.001%的原虫密度。本世纪之交发展起来的DNA 微阵列(DNA microarray),或称DNA芯片(DNAchips)技术通过高通量、自动化的DNA 杂交检测,可在一张芯片上同时检测成千上万个DNA 片段,将为包括寄生虫病在内的感染性疾病和遗传性疾病的基因诊断带来一场革命。理论上, 检测某种寄生虫的特异性DNA片段与检测虫体具有同样的诊断价值。
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